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植物類黃酮含量檢測(cè)試劑盒代測(cè)服務(wù)說明

植物類黃酮含量檢測(cè)試劑盒

Plant Flavonoids Content Assay Kit


產(chǎn)品描述

植物類黃酮是廣泛存在于蔬菜、水果、牧草和藥用植物中的次生代謝物,主要以游離態(tài)或與糖結(jié) 合為苷的形式存在,屬于生物活性強(qiáng)、毒副作用小、藥用價(jià)值高的天然植物成分,在醫(yī)藥領(lǐng)域具有廣 闊的應(yīng)用前景和潛在的開發(fā)利用價(jià)值。 類黃酮與鋁離子能夠在堿性亞硝酸鹽溶液中形成紅色絡(luò)合物,產(chǎn)物在 510 nm 處具有特征吸收峰, 通過吸光值的變化即可定量檢測(cè)植物類黃酮的含量。

 

QQ截圖20210610123053.png

產(chǎn)品使用說明

測(cè)定過程中所需要的儀器和試劑:可見分光光度計(jì)、1 mL 玻璃比色皿、研缽/勻漿器、可調(diào)式移 液器、臺(tái)式離心機(jī)、恒溫水浴/培養(yǎng)箱和蒸餾水。

1.植物類黃酮的提取(可根據(jù)預(yù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果適當(dāng)調(diào)整樣本量及比例) 取適量植物樣本烘干至恒重,粉碎后過 30-50 目篩;稱取 0.1 g 粉碎樣本,加入 1 mL 提取液,超 聲提取(60℃,功率 300 W,超聲 5 s,間歇 8 s,總時(shí)間 30 min);12000 rpm 常溫離心 10 min,取全 部上清即為待測(cè)樣本。

2.測(cè)定步驟 

①分光光度計(jì)預(yù)熱 30 min 以上,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至 510 nm,蒸餾水調(diào)零。

②在離心管中依次加入下列試劑:

圖片1.png


吸光值測(cè)定(顯色后 1 h 內(nèi)完成測(cè)定):將反應(yīng)液置于 1 mL 玻璃比色皿中,測(cè)定 510 nm 處吸光 值,記為 A 測(cè)定、A 對(duì)照、A 標(biāo)準(zhǔn)和 A 空白;計(jì)算?A 測(cè)定=A 測(cè)定-A 對(duì)照,?A 標(biāo)準(zhǔn)=A 標(biāo)準(zhǔn)-A 空 白。注:每個(gè)測(cè)定管均需設(shè)一個(gè)對(duì)照管,空白管只需測(cè)定 1-2 次。

標(biāo)準(zhǔn)曲線的建立:以 0.4、0.2、0.1、0.05、0.025 mg/mL 為橫坐標(biāo)(x),以其對(duì)應(yīng)的?A 標(biāo)準(zhǔn)為縱 坐標(biāo)(y),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,得到標(biāo)準(zhǔn)方程 y=kx+b,將?A 測(cè)定帶入公式中得到 x(mg/mL)。

1. 植物類黃酮含量的計(jì)算

圖片2.png

注意事項(xiàng) 

①若?A 測(cè)定超出標(biāo)準(zhǔn)線性吸光值范圍:建議適當(dāng)增加樣本量或?qū)⒋郎y(cè)樣本適當(dāng)稀釋后再進(jìn)行測(cè) 定,計(jì)算時(shí)相應(yīng)修改;

②為保證結(jié)果準(zhǔn)確且避免試劑損失,測(cè)定前請(qǐng)仔細(xì)閱讀說明書(以實(shí)際收到說明書內(nèi)容為準(zhǔn)), 確認(rèn)試劑儲(chǔ)存和準(zhǔn)備是否充分,操作步驟是否清楚,且務(wù)必取2-3個(gè)預(yù)期差異較大的樣本進(jìn)行預(yù)測(cè)定, 過程中問題請(qǐng)您及時(shí)與工作人員聯(lián)系。


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